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点击磜en?51 fa布时间:2020-05-25

清chen,美好dekai始,我司祝您今天jing神棒棒,活力多多,衝a楹煤茫磺卸己茫狘/p>

na么,您知道ELISA试剂盒xu多重要de环jie都会影响到ELISA试剂盒检测de质量吗?下面我公司ji术人员yu大家唠唠ELISA管理de相关信息: 

一、方法学de影响

ELISA测定模式包括以下几种:双抗tijia心法、间接法、双抗原jia心法、IgM抗ti捕捉法、jing争抑zhi法,其中jing争抑zhi法因shou操zuo时cha所引qide不gong平jing争等因素de影响,结果重复性较cha,质量较难控zhi。

二、试剂因素

1.试剂dexuan择

mian疫检测de原理jun基于抗原抗ti反应。you于gai反应过chengshou多种因素de影响,如pu遍存在基质效应、交叉反应等,因而检测结果难以溯源,不同方法、不同试剂之间甚至同一试剂不同批号间结果jun缺乏可比性。试剂质量在很大cheng度shang决定liao检测de水平,因此在引入新项目之qian必须对试剂进行严格de评估。

试剂de评估有以下几个步骤:

⑴确定kaizhangai项目de必要性;

⑵liaojiegai项目xian有de检测方法和原理;

⑶在liaojie试剂de组成基础shangxuan择多家试剂盒进行比较,判断biao准应xuan参考方法huo参考wu质,其次为临床de满意度及机构de报告如各ji室间质量评价、CDC报告等;

⑷定期对检测结果进行追zong反馈直至终认可gai试剂。

2.试剂de准备

不同批次deELISA试剂在zhizuo过cheng中很难保证质量wan全一致,即使是通过批批检de项目其检测结果ye存在cha异,因此必须xuan择和订gou长批号de试剂,并保证保存tiaojian。严格执行这一biao准可以避mian因试剂批号改变而重新建立质控ti系及重新评估试剂de复za过cheng,并且能够保证结果de稳定性uanza谛赿uan、使用lv低de试剂,应当xiao量分装,每磜en褂迷騫u分装部分即可,避mian反复冻rong造成试剂de失效。

试剂使觤en氨匦肫胶庵潦椅拢裨蚧嵊跋旒觳庀聏ian。wei用wande室内质控pin及本次不需使用de试剂应密封并及时放回bing箱保存。

san、样本因素

biao本干扰因素包括内源性干扰因素和外源性干扰因素,qian者包括lei风湿因子、补ti、异shi性抗ti、自身抗ti、溶菌酶等,后者包括biao本溶血、biao本被细菌污ran、biao眏u媸奔涔ぁiao本凝固不全、冷冻biao本de反复冻rong祋uF渲型庠葱愿扇乓蛩厥俏襪en在检测过cheng中可以避mianye是必须避miande因素,而避mian内源性因素de干扰则主要通过xuan择he适de试剂簒iaoT诹俅仓衴u到少jiande疑难病li时应当考虑到内源性干扰因素de存在。

以下对外源性干扰因素进行简要说明:

(1)biao本溶血 要注意避mian出xian褁ian厝苎Q猦ong蛋bai中han有血hong素基团,其具有lei过氧化wude活性,因此,在以辣gen过氧化wu酶(horseradish peroxidase,HRP)为biao记酶deELISA测定中,如果血清biao眏u醒猦ong蛋bainong度较高,则其就很容易在温yu过cheng中吸附于固相,从而yu后面加入de底wu反应xian色。

(2)biao本被细菌污ran biao本de采ji及血清分离要注意尽量避mian细菌污ran。细菌菌ti中除可能han有内源酶对测定产生非特异性干扰外,还可能对抗原抗ti等蛋bai产生分jiezuo用。另外biao本在保存中出xian浑浊huo絮状wu时,应离心chen淀后qushang清检测。

(3)biao眏u媸奔涔 biao本在低温下保存时间过长,IgG可聚he成多聚ti,在间接法ELISA测定中会导致本底紋ou睢⑸踔脸鰔ian假阳性结果。通常情况下血清biao本可在2~8℃下保存l周,冷冻保存时间会更长,但秡a诳箃ihuo抗原han量低debiao本而言,则可能会因抗ti掉价、抗原分jie而出xian假阴性结果。

(4)ELISA试剂盒biao本凝固不全 血液通常在采ji后半xiao时后kai始凝固,18~24hwan全凝固。如果在血液wei凝固时即离心分离血清,则可因蛋bai原非特异吸附于微孔而造成假阳性结果。为liaosuoduanbiao本处理时间,可以在离心qian将血液biao眏u糜谖孪渲形聐uhuo者采用带分离胶de采血管huo于采血管中加入适当de促凝剂以加su血清de分离。

(5)冷冻保存biao本避mian反复冻rong biao本de反复冻rong会因其所产生de机xie剪切力对biao眏u衐e蛋bai等分子产生破坏zuo用,使抗ti效价die落从而引qi假阴性结果,ELISA试剂盒所以测抗tide血清biao本如需保存zuo多次检测,宜少量分装冻存。此外,biao本在冻存时会因蛋bai质ju部nongsuo,分布不jun,因此重新rongjiedebiao本必须混匀,但不要进行剧烈zhen荡,反复颠dao即可。 

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